本生課堂：熒光定量PCR(qPCR)檢測服務(含內參)

　　一、服務概述

　　實時熒光定量PCR(Real Time PCR)技術，是指在PCR指數擴增期間通過連續監測熒光信號強弱的變化來即時測定特異性產物的量，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。熒光定量PCR的熒光檢出方法包括SYBR green(熒光染料摻入法) 和Taqman probe (探針法)兩種方法。

　　二、服務內容

　　1.從動物細胞、人或動物組織等樣品中提取核酸;

　　2.對核酸進行濃度及純度分析;

　　3.熒光定量PCR檢測;

　　(1)引物和探針的設計與合成;

　　(2)絕對定量和相對定量的選擇;

　　(3)探針法和染料法的選擇;

　　(4)熒光定量PCR儀對目的基因的檢測;

　　(5)數據統計和分析;

　　4.預實驗服務：根據客戶提供的目的基因序列或NCBI序列號提供客戶引物和探針，并篩選出化的引物和探針;

　　5.正式實驗服務：根據預實驗篩選的引物和探針對所用樣品進行熒光定量PCR的檢測，并對結果進行統計和分析。

　　三、樣品要求

　　細胞>1×106個;組織>50mg;細菌濕重>50mg

　　項目服務 內容 周期(工作日)

　　抽提樣品DNA或RNA 細胞樣品 5

　　組織樣品 5

　　引物設計與合成 優化引物&探針設計及合成 7

　　優化引物設計及合成 5

　　引物合成 3

　　RT反應 mRNA反轉錄成cDNA 5

　　標準曲線制作 相對定量(雙標準曲線法) 5

　　絕對定量

　　熒光PCR檢測 基因 10

　　四、客戶需提供

　　1.請提供新鮮材料或直接提供已純化的DNA/RNA，確保總量>5μg/樣品。如果目的基因表達量較低時，應盡量提供更高濃度的總RNA或DNA;

　　2.請提供已知的全長基因序列(GeneBank Accession Number、Gene ID);

　　3.請提供盡可能詳細的背景資料：生物物種信息(Human、Mouse、Rat等)、DNA/RNA來源、豐度等;

　　4.客戶可以提供引物，沒有引物的情況下，本公司幫助設計合成。

　　五、BUSNEN本生提供

　　1.RNA抽提和PCR擴增電泳結果的數碼拍照，定量PCR實驗結果原始文件及相關軟件;

　　2.提供實驗報告，包括實驗方法、步驟、所用試劑、儀器、數碼照片及相關分析數據等，如有必要可以協助客戶進行相關的數據處理和分析。

　　抗體本生一直視質量控制為企業的生命，追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業精神作為標準，以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創美好的未來。